病理实验

日期:2018-07-20 15:46:54来源:彩计划APP浏览次数:202次

1. HE染色:

H&E染色

材料:石蜡切片

染料:苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。

应用:一般的组织变化和组织产物都可以通过这一染色法显示出来,是形态学最常用的染色方法。

结果:细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。


2. 甲苯胺蓝染色:

甲苯胺蓝染色

材料:石蜡切片,细胞爬片

染料:甲苯胺蓝,人工合成的碱性染料,组织细胞中酸性物质与其中阳离子相结合而被染色

应用:尖锐湿疣的初筛及肥大细胞的检测,细胞内酸性黏液多糖染色,神经细胞尼氏小体染色

结果:可染细胞核呈蓝色,肥大细胞胞质内肝素和组织胺等异色性物质可呈易染性紫红色,软骨、成骨细胞呈紫红色,酸性黏多糖呈红色,尼氏小体呈深蓝色。


3. 天狼星红苦味酸染色

天狼星红染色

材料:4%甲醛固定组织石蜡切片

染料:天狼星红-饱和苦味酸液

应用:利用胶原蛋白聚合及其缠绕螺旋排列不同的特点,该染色法可在偏振光显微镜下,根据双折光性和着色的不同,分别显示出四型胶原纤维。

结果:普通光镜:胶原纤维呈红色,细胞核呈绿色,其他成分呈黄色。

         偏振光显微镜:Ⅰ型胶原纤维:红色或黄色,排列紧密,具强双折光性;

         Ⅱ型胶原纤维:多种色彩,疏松网状、弱双折光性;

         Ⅲ型胶原纤维:绿色,细纤维、弱双折光性;

         Ⅳ型胶原纤维:淡黄色、弱双折光性。


4. TUNEL染色

TUNEL荧光染色

材料:石蜡包埋、冰冻和超薄切片,细胞

染料:荧光素标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT酶)的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂DNA的3’-OH末端,并与连接辣根过氧化物酶(HRP)的荧光素抗体特异性结合,后者又与HRP底物二氨基联苯胺(DAB)反应产生很强的颜色反应。

应用及结果:单细胞水平上的凋亡原位检测,抗肿瘤药的药效评价及通过双色法确定细胞死亡类型和分化阶段。凋亡细胞核染色呈深棕色,正常或正在增殖细胞不被染色。


5. 免疫染色

免疫细胞化学

包括免疫组织化学(IHC)/免疫细胞化学(ICC)和免疫荧光(IF),均是通过可视化抗原抗体结合反应,对组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)定性、定位和相对定量的彩计划APP。IHC和ICC使用的显色剂多为酶,即化学显色;IF使用的显色剂多为荧光素,即荧光显色。

材料:细胞、冰冻切片、石蜡切片

应用:恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断,转移性恶性肿瘤的原发部位确认,肿瘤的病理分型,微小转移灶确认,阳性产物定位、相对定量,细胞凋亡检测。

 

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